PCR анализ на препис като се вземат при мъжете и жените
Силно информационен метод PCR (полимеразна верижна реакция) позволява ранно откриване на различни генетични и инфекциозни заболявания, настъпили остро или хронично. И те могат да бъдат идентифицирани още на етап, когато те не се показват никакви самите симптоми. Най-често прибягват до PCR анализ за откриване на полово предавани инфекции (ППИ, STI).
Какво е PCR анализ
PCR анализ се отнася до молекулярни методи за диагностика, които се основават на множествен увеличение на ниски концентрации на специфични фрагменти от нуклеинови киселини (ДНК) на патогена в биологичен материал (кръв намазване на шийката на матката, вагината, уретрата, кръв, слюнка, слюнка и други подобни. D.) и сравнение ДНК или РНК с база данни за известни типове данни инфекции.
Предимства на PCR диагностика в сравнение с други методи
PCR техника се използва широко в съвременната медицина се дължи на редица безспорни предимства. Ние ще ви разкажа за тях по-подробно.
Способността за директно откриване на наличието на патогена
Много от традиционните диагностични техники се основават на определянето на маркери - протеини, които са продукт на жизнената дейност на патогена. Такъв диагностичен принцип може да даде само едно косвено доказателство за патология. PCR метод осигурява директно определяне на патогена, тъй идентифицира специфичните региони на ДНК на патогенни организми.
висока специфичност
PCR методология различава поради висока специфичност, която дава възможност за откриване на ДНК фрагменти, които са специфични за определен инфекциозен агент. При използване на имунологични методи е вероятността за получаване на лъжливо резултат (грешка в диагностиката, свързани с кръстосано-реактивни антигени). По отношение на PCR, грешките са отстранени, тъй като спецификата в този случай се дава от нуклеотидната секвенция на праймерите.
висока чувствителност
Чрез този метод, дори отделни патогени са определени. Патогени са открити в човешкото тяло, дори когато други диагностични методи не бъде изяснена ситуацията (ние говорим за различни имунологични микроскопични и бактериологични методи на изследване).
Това са данните за сравнение. Чувствителност микроскопични и имунологични методи за 103-105 клетки и чувствителността на PCR - 10-100 клетки в пробата.
Общи методи
Техниката на PCR се основава на изследване на ДНК на патогенни организми. Проучването определя ДНК или РНК фрагменти, които са специфични за специфични патогени. Тъй като всички нуклеинови киселини имат подобен химичен състав, в техники за лабораторен анализ може да се прилага еднакво. Това означава, че разследването на пробата дава възможност да се открият множество патогени.
Бързи резултати
Тази техника не изисква използването на култури патогени, които отнемат много време. Чрез използването на стандартизирана технология за обработка на материали и разкриване на продукти от реакция, както и автоматизиран процес всички проучването на процедура усилване отнема няколко часа.
Способност за откриване на инфекция в латентна форма
Техниката PCR дава възможност да изпълнява ефективно предклинични диагностика (откриване на патогени преди появата на симптоми) и последващо диагноза (определяне на патогени след подлагане на заболяване). По този начин, предклинична диагностика е от голямо значение при разглеждането на пациента в инкубационен период на заболяването е възможно - след предполагаемата инфекция до появата на първите симптоми.
Едно важно предимство е възможността да се използва PCR да анализира биологични остатъци или архивни материали. Това дава възможност да се определи бащинството и идентичност.
Методът на PCR
В основата на този метод за диагноза се повтаря удвояване на част от РНК или ДНК. Този процес се осъществява в лабораторията използване на специфични ензими. В резултат, оформен като региони на ДНК (РНК), както е необходимо за визуална проверка. По време на процедурата само копираната част, съответстваща на зададени условия (ако присъства в изследвана проба).
В следващия етап на резултатите диагноза се анализират и се сравняват с база данни от инфекции.
PCR техника е не само ви позволява да се определи вида на патоген, но също така ви позволява да се направят изводи за броя на патогени в човешкото тяло.
Днес, използването на такава технология предлага чудесни възможности за мутации проучване, снаждане ДНК области. В съвременната медицина, методът започва да се използва за определяне на бащинство, идентифициране на нови гени и др.
Благодарение на своята гъвкавост PCR метод се използва широко в урологията, гинекологията, пулмология, онкология, хематология, туберкулоза, инфекциозно заболяване практика и други области на медицината.
Материалът за PCR анализ
PCR диагностика прилагат различни течност биологична среда взети от човешкото тяло: храчки, слуз, слюнка, урина, кръв, остъргване епителни клетки, плацента тъкан, плеврална течност, амниотична течност, простатата сок и др.
При диагностицирането на полово предавани болести (полово) се подлагат на анализ на освобождаване от мъжките и женските репродуктивни органи. За да направите това, изпълнете се замъгли или изстържете от уретрата или шийката на матката. Тя се използва и за изследване на урина.
За да се идентифицират инфекции (херпес, мононуклеоза, цитомегаловирус, токсоплазмоза, ХИВ, хепатит В и С) в анализа на кръв е взета. За предполагаеми лезии на нервната система произвежда ограда цереброспинална течност.
За белодробна изследвания с помощта на плеврална течност и храчки.
За откриване на вътрематочни инфекции плацента тъкан се подлага на анализ и околоплодна течност.
PCR за ППИ и други инфекции
Какво инфекция може да бъде открит чрез PCR анализ
- ХИВ инфекция (може да бъде идентифициран имунодефицитен вирус HIV-1).
- Вирусен хепатит А, В, С, G (РНК-HAV, HBV ДНК, РНК-HCV, РНК-HGV).
- ППИ (полово предавани инфекции) - от ureaplasmosis, бактериална вагиноза, хламидия, микоплазмоза, трихомониаза.
- Инфекциозна мононуклеоза (Epstein-Barr ДНК -VEB).
- Цитомегаловирусна инфекция (ДНК-CMV).
- Херпесна инфекция (херпес симплекс вирус ДНК на HSV типове 1 и 2).
- Туберкулоза (Mycobacterium туберкулоза).
- Онкогенни вируси - вирусна инфекция (човешки папиломен вирус (включително неговите онкогенни видове 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58 и 59).
- Лаймска болест, кърлежи енцефалит.
- Кандидоза (гъбички от рода Candida).
- Helicobacter Pylori инфекция (Helicobacter Pylori)
и др.
Подготовка и подаване на PCR
Пациенти, които са преминали материал за диагностика PCR, разчитат на получаване на бърз и точен резултат. Така че е необходимо да се вземат предвид един важен момент - точността на диагнозата не зависи само от професионализма и способностите на медицинската лаборатория. За изследване е информативен, той трябва да направи усилие и самия пациент. Така че, трябва да се придържа стриктно към всички препоръки на лекаря и следвайте внимателно правилата на подготовка за събиране на материал. Важно е да се избегне замърсяването на биологични проби, в противен случай резултатите от проучването ще бъдат изопачени.
Получаване за PCR анализ
Подготовка за процедурата не е свързано с особени предизвикателства. Достатъчно е да се помни няколко правила:
- Кръв PCR анализ на гладно. Кръвта се взима от вената, обикновено в сутрешния стерилна игла в специален контейнер.
- През дни преди приема на материала е показано въздържание по време на залавянето PCR намазка STI.
- Урината PCR се първата част, контейнерът трябва да бъдат стерилни.
Как да се анализ на PCR при мъжете и жените
PCR анализ е взето от мъжете и жените в залата за ваксинация, тя е кръв от вената, слюнка натривки от гърлото, сливиците, секрети от носа, от т.н. Метод за вземане на проби е по-различно.
PCR STI седне в гинекологичен кабинет при гинекологичен преглед при жените е вагинални натривки на шийката на матката, пикочния канал. При мъжете по време на посещение андролог или венеролог е натривка от уретрата.
Схема ограда материал за PCR
Схема ограда материал от носа PCR
Схема ограда материал с PCR сливиците
Схема ограда материал с PCR конюнктивата
Схема ограда материал за PCR с устната лигавица
Схема ограда материал за PCR при жени
Схема ограда материал за PCR при мъжете
Колко време PCR
Пациентите не трябва да чакат дълго, за резултатите от PCR изследването. На цялата процедура по анализ обикновено отнема от няколко часа (в реално време PCR) до 2-10 дни. Като правило, резултатите в ръцете си пациентът получава 2-5 дни до максимум 10 дни, това зависи от вида на анализа. PCR диагностика е най-дългата кръвта за ХИВ и хепатит, и най-малко от всички тампони и шпакловки - 2-3 дни.
Транскрипция PCR анализ
Отрицателният резултат показва, че в този момент в биологичния материал не могат да бъдат открити следи от патогени. Т.е. инфекция, за която е проведено изследването, не.
Положителният резултат показва откриване на следи от патогена в биологична проба. Това означава, че в този момент се намира в човешкото тяло на инфекцията.
Може да има случаи, когато PCR дава положителен резултат, но се наблюдава активна инфекция. Става дума за явление, което се нарича "здравословен превозвач". така че пациентът не се нуждае от лечение, но те трябва да бъдат под постоянно наблюдение динамичен. Такива ситуации са характерни за вирусни инфекции: Epstein-Barr вирус (EBV), ginitalny херпес, цитомегаловирус (CMV), човешки папилома вирус (HPV), в която да се проучи проби са взети от местните камери (остъргване на уретрата, шийката на матката, слюнка). В същото време не трябва да забравяме, че здрави носители могат да преминат на инфекцията на други хора. Също така, не изключват активирането на процеса на инфекция. В случаите, когато PCR даде положителен резултат при изследване на кръв, той не може да се счита за превоз. Тези пациенти се нуждаят от специфично лечение на заболяването, причинено от патоген засича.
Количествените показатели не са често срещани градации. Тяхната лекар преценява индивидуално за всеки конкретен инфекция. Количествени резултати позволява да се определи колко активна инфекция и идентифициране на процеса стъпка.
Надеждността на метода PCR
За да се оцени ефективността на методите, има три критерия:
- Точност - откриване на инфекция (или липсата на такава) с висока степен на вероятност.
- Специфична - точността на определянето на специфичен патоген.
- Чувствителност - способността да се идентифицират патогена дори малко количество на генетичен материал в биологична проба.
При използване на метода PCR за получаване на лъжливо положителни резултати на практика е невъзможно (тоест, ако патогена отсъства, тогава положителна проба, не ще).
Фалшиви-отрицателен резултат е възможно, но това се случва рядко. Подобни ситуации се случват, ако инфекцията по време на проучването не е активен. Например, хронична инфекция е активна или латентна инфекция.