Лабораторни методи за диагностициране сифилис
Полимеразна верижна реакция
Всички серологични изследователски методи, които се използват днес, условно разделени на два типа: не-treponemal. Квалификации (NTT) - и treponemal. което да потвърди наличието на патогена (TT) .Sifilis потоци е много трудно, клиниката е много неясно и не винаги е очевидно, така че решението за използване на точна диагноза, няколко серологични тестове. Когато потвърждение на графиката взето в присъствието на материала Treponema Pallidum на (под микроскоп) диагностицира веднага, а останалата част от тестовете са редки.
Netreponemnye изследвания (тестове) - NTT - така наречените проучванията за проверка, те не са много скъпи и доста голям брой от пациентите могат да бъдат проверявани чрез тях, за да получат същите резултати в много тестове готови много бързо. Но фалшив ход на болестта, провеждане на такива тестове непрактично 100% резултат няма да бъде в състояние да получи по-ниска чувствителност.
При извършване на тест материал без treponemal се разглежда, те имат антитела, които реагират с кардиолипин - лецитин антиген. Един от първите тестове е метод, основан на имунологична реакция Bordet - Джан, който е действал като антиген на екстракта на черния дроб на новороденото, който умира от сифилис. В момента по време на тези тестове антиген акт лецитин, холестерол, и кардиолипин.
Чужбина, особено в САЩ използва 4 nontreponemal метод, които са разделени на два типа: методи, които позволяват визуално определяне на резултатите от реакция (RPR и доверие) и методи за микроскопични резултати показания (спешни мерки и VDRL).
Чрез netreponemnye диагностични методи включват индиректен ензимен имуноанализ използване като антиген кардиолипин. В нашата страна и в страните от ОНД като не-treponemal тестове на са реакцията на плазма с инактивирана серум (MP) и реакцията в които свързването на комплимент към карди (РСК).
Всички методи netreponemnye диагноза са много подобни един на друг. Те всички ниска цена, просто и го пази. Тези видове тестове не са подходящи за откриване на заболяване в началния етап и сифилис, което се случва тайно (латентна форма на сифилис). Антитела, които се определят чрез не-treponemal тестове показват някъде в един месец след treponemoy инфекция. В повечето случаи, пациенти, които са лекувани с началния етап на сифилис, около година тестове не са treponemal са отрицателни.
Treponemal изследвания (тестове) - TT са много по-скъпи техника от тях са много сложни и те се използват за потвърждение на положителните резултати, които са получени от изследвания, които не са treponemal.
Както казахме по-горе методи treponemal се използва, за да се потвърди наличието на Treponema Pallidum в тялото, което се идентифицира с помощта на не-treponemal тестове. Точно както те се извършват, ако се извършва тестове и не са дали положителен резултат, но клиниката предполага наличието на болестта. След пълно излекуване на сифилис в повече от 80% излекувани, положителен отговор по време на treponemal тества няколко години, а някои - за цял живот. Въз основа на тази treponemal тестове не се използват за рутинни проверки на хора, които са завършили пълния курс на лечение.
Научни изследвания в областта на имунологията и молекулярната биология продължи да поддържа и използва най-новата технология има нови тестове за диагностика на сифилис, който има водеща позиция. Един такъв тест, който е твърдо установена практика - свързан имуносорбентен анализ (ELISA). и много изследователски методи са разработени.
Комплексът на серологични тестове. който се провежда в България, включва цялостен провеждане на серологични тестове:
стандартни серологични тестове -
допълва свързваща реакция (Wassermann реакция)
взаимодейства с treponemal антиген, и реагира с кардиолипин;
treponemal реакции е за Група
Реакционната имунофлуоресценция (IFA)
свързване имунен отговор (RIP);
видове-специфичен протеин treponemal реакции -
обездвижване реакционни treponemes (RHS),
FTA - ABS и неговите варианти (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),
реакционни пасивни gemaglyutsinatsii treponemes (РНА).
Ако се използват серологични тестове в комбинация, това ще позволи да се идентифицират заболяването в ранен стадий на заболяването.
Васерман - е метод за свързване на комплемента. За реакцията се използва като антиген екстракти, които са произведени от бледо treponemes (специфични антигени) и кардиолипин - този екстракт, приготвен от говежди сърдечния мускул (не-специфични антигени). Колкото повече е в материала на бледо treponemes, толкова по-голяма степента на заболяването и оценка на степента на предимства:
1) - отрицателен; 2) + съмнително; 3) ++ слабо положителен; 4) +++ положителен; 5) ++++ rezkopolozhitelnaya.
Wasserman (свързване на комплемента реакция) задължително прекарват заедно с утаечни реакции - Sachs - Vitebsk и Кан. Имунологичният естеството на реакциите obschem- същата като тази на реакцията Wassermann, но тези реакции изискват богати антигени, които, когато влизат в реакция със серум reagin даде повече утайка. Серонегативни зададен основен сифилис, ако стандартните серологични тестове дадоха отрицателен резултат. Идентификация сифилис Васерман реакция ефективно при серопозитивни вторичен сифилис, ето резултатите от теста по правилен 100%. На трето стъпало на резултатите от сифилис са правилни активна в повече от половината от пациентите, и по-късните етапи на сифилис, с поражение на вътрешните органи и системи, резултатите са правилно половината от пациентите. При пациенти с ранен вроден сифилис серологични тестове дават положителен резултат е почти винаги е така. и при пациенти с късен вроден сифилис - почти 80% от случаите.
принцип RSK е, че reagin намерени в серума на пациенти с сифилис, имат способността да влиза в връзка с различни антигени. Получените комплекси са подредени взаимодействие на комплемента. хемолитична система се използва за показване комплекс reagin антиген-комплемент (смес от овчи червени кръвни клетки с хемолитична серум). В присъствието на червените кръвни клетки на комплекса да се утаи. Това не значително vooruzhenynm очите. Тежестта на хемолиза определен лекар ключове: рязко положителен 4+, 3+ положителен, слабо положителен 1+ 2+ дали и отрицателни. Също качествена оценка на тези реакции има и количествено определяне на значение при диагностицирането на някои етапи от сифилис и мониторинг на ефективността на терапията
Реакция имунофлуоресценция (IFA) се основава на откриването на антитела, които са обозначени със специфичен флуоресцентен разтвор на виолетова светлина кварцова лампа е свързан за откриване на антиген антитяло. Тази реакция е с висока чувствителност и помага за идентифициране на болестта в началния етап на сифилис серонегативни. Просто точно този тест помага за откриване на заболяването при пациенти, при които заболяването е латентни или късни етапи. Съществуват няколко вида на такива реакции и най-уважаваните RIF-200, с помощта на които можете да се идентифицират латентни сифилис и идентифициране на неспецифични резултати КПР. Но въпреки високите нива на RIF-200, официална диагноза се случва, след като всички клинични тестове. RIF не е подходящ за пациенти, мониторинг след пълното лечение. тъй negativiruetsya достатъчно бавно, на етапа на лечение.
Реакция immunogo адхезия (RIP). В основата на тази реакция се намира адхезионни treponemes че сенсибилизиращи серум, еритроцитите и тяхната загуба в утайката. Резултатите се оценяват според следната таблица:
До всички показания RIP е много подобен на RIT и RIF. Тази реакция се извършва в няколко случая, ако въз основа на клиничните симптоми, медицинска история, лабораторни изпитвания сифилис не бъде потвърдено, за борба с болестта след получаване на необходимото лечение и да се потвърди резултатите от БРСЕ.
Реакция обездвижване бледо treponemes (RHS) .Popav в среда, където има immobiliziny тестов серум и активно допълнение, бледо трепонемите губят тяхната мобилност. Въз основа на тази и тази реакция. RIT е много специфична и се използва за признаване на латентни сифилис, за диагностициране на бременност. който е заподозрян сифилис и много други случаи, в които стандартните серологични тестове малко специфични. Големият недостатък на тази реакция е, че е много скъпо и неговата дейност - един много сложен процес. Резултатите се отчитат на обездвижване данни интерес бледо treponemes:
-Отрицателни - 20%; -somnitelnaya -21-30%; -slabopolozhitelnaya -31-50%; положително -51-100%.
Поради факта, че immobiliziny появи в кръвта след друг антитела става положително-късно по време на други реакции. В началния етап на инфекция, като правило, има отрицателен или слабо положителна реакция. В вторичен етап на сифилис, въпреки серум immobilizinov вид на пациента е до 60%, реакцията е положителен, в почти половината от изпитването. На връщане на болестта вторичен етап на сифилис RHS положителни почти 90% от пациентите. В третичен етап на развитие сифилис, с поражението на вътрешните органи, включително нервна система, когато Wasserman дава негативни резултати, реакцията на обездвижване бледо treponem положителен почти 100% от пациентите. На ранен етап на вродена реакция сифилис е положителен при почти всички пациенти, но в по-късен етап от вроден сифилис - почти 100% от пациентите. Серопозитивни латентен сифилис се потвърждава само след RHS, която се провежда след получаване на положителни резултати по време на други серологични тестове. RIT не се използва за контрол на заболяването при пациенти. които са получили необходимото лечение.
усвояване имунофлуоресцентен с Treponema Pallidum (FTA-ABS) .Ако реакцията се провежда в продължение на пациент, който е болен със сифилис и не се лекува, а след това реакцията даде положителен резултат винаги. Също така е възможно да се разкрие инфекция с помощта на FTA-ABS в началото на заболяването. Реакцията е с висока чувствителност и специфичност. За диагнозата на латентен сифилис, и в тези случаи, когато това се извършва на няколко изследвания и те показаха отрицателен резултат, но клиниката казва инфекция Treponema Pallidum, в такива случаи, диагнозата често се основава на резултатите от FTA-ABS. Една седмица след като бледо Treponema удари в тялото започва да произвежда антитела, специфични IgM, които в крайна сметка ще престанат да се появяват след 2 години не са били определени. За да се разбере дали предложеното лечение дава ефект, провеждане на специални тестове за определяне на специфичността на тези антитела. Такива тестове на днешния ден има няколко, но притежаващи тях твърде скъпо, така че за по-голямата част от пациентите, тези тестове не са извършени.
Хемаглутинационни реакция. който определя специфични антитела да Treponema Pallidum (микро-РНА). За тази реакция, като антиген са Treponema, така че тази реакция е много специфичен и дава достоверни резултати в повечето случаи.
Имуносорбентен анализ (ELISA), един от най-специфично за диагностика на сифилис. В момента, най-често използваната версия на непряка ELISA. Предимствата на този метод на научните изследвания са ясни: не е твърде много разходи, лекота на достатъчно висока точност на резултата, с помощта на този анализ може да се установи по-ранен етап на сифилис, най-бързи резултати.
Методът на имуноблотинг се основава на ензимен имуноанализ, който е комбиниран с електрофореза. Той е един от най-специфичните тестове и с негова помощ има потвърждаване на инфекцията със сифилис.